动物行为实验指南:大小鼠爬杆测试实验方法总结

以下文章来源于脑声常谈,作者小欣博士。




模型概述

爬杆测试是一种广泛用于评估啮齿类动物运动功能障碍的行为测试。该程序要求小鼠在杆上抓握和操纵以下降到杆底部,可以评估动物的运动协调能力。在测试期间,将小鼠的头部朝上放置在杆的顶部,动物通常会自然地向下定向并沿着杆子不间断地降至地面,以便返回它们的饲养笼。记录动物自动转向的潜伏期(Tturn)和下降到杆子底部所需的总时间(Ttotal)。爬杆实验最早由Ogawa及其同事设计并用于MPTP(多巴胺能的神经毒素)处理小鼠(帕金森综合征小鼠模型)运动迟缓的研究,结果表明了使用这些动物的爬杆测试在筛选抗帕金森病药物方面具有重要价值。


- 爬杆测试,上海欣软 -


实验材料


(一) 实验动物:爬杆测试适用于小鼠研究。


例如ICR小鼠,C57BL / 6J小鼠等。研究表明该任务表现没有性别差异。本范式几乎不在大鼠中应用,因为它们体重更大,在出现运动功能障碍后很难执行任务。


*注意

动物的年龄,体重以及紧张恐惧程度会影响任务的表现。应该尽量使动物个体间的差异较小,或者平衡分组。另外要确保动物进行了充分的环境适应以及与测试者的适应,可以减少动物的紧张情绪。

(二) 测试爬杆:杆的直径一般5~10毫米,高45~55厘米。


爬杆的顶部装有一个木球/橡胶球,以防止小鼠坐在杆顶部不下降至底部。杆表面应粗糙,可以用纱布包裹以防止小鼠打滑或者顺杆滑下,杆底座可以置于饲养笼中,因为小鼠可能更喜欢下降到熟悉的位置。注意杆和底座的连接要十分稳定。目前商品化的测试杆,其和地面的角度可调节(调节范围:0~180°),适用于多种测试方案。


*注意

实验结果可能根据实验条件的不同而变化,例如杆表面粗糙度、直径和高度等。建议进行文献检索,尽量选择与文献一致的条件,便于比较实验结果。

(三) 铺设垫料的饲养笼。


(四)计时器。


(五)75%酒精,纸巾等清洁用品。


(六)可选配VisuTrack视频跟踪系统(上海欣软),可以用于回溯分析(可选,推荐)。


- VisuTrack软件效果展示,上海欣软 -


*注意

小鼠的下降速度较快,对照组完成任务用时通常小于10 s,对这么短的时间进行人工秒表计时,通常会由于实验人员的反应时间带来的一定的误差。但是通过视频跟踪,可以抓取小鼠的重心轨迹,利用软件自动计时,可极大减少人工误差。而且方便记录小鼠的明显运动障碍,失衡或旋转等异常行为表现。



实验程序

1.爬杆的顶部装有一个木球/橡胶球,以防止小鼠坐在杆顶部不下降至底部。杆表面应粗糙,可以用纱布包裹以防止小鼠打滑或者顺杆滑下,杆底座可以置于饲养笼中,因为小鼠可能更喜欢下降到熟悉的位置。注意杆和底座的连接要十分稳定。目前商品化的测试杆,其和地面的角度可调节(调节范围:0~180°),适用于多种测试方案。


后续步骤详见印刷版《动物行为实验指南》


数据收集和统计分析

详见印刷版《动物行为实验指南》一书!


- 小鼠爬杆测试 -


模型应用

1.爬杆测试可用于定量评估由MPTP诱导的运动迟缓,研究帕金森综合征的病理生理学,开发新的抗帕金森病药物。


2.爬杆测试不仅在MPTP诱导的帕金森综合征模型中具有价值,而且在评估与精神安定药相关的锥体外系副作用方面也有价值。


3.爬杆测试可以用于预测6-OHDA病变小鼠病变程度,目的是选择多巴胺能细胞的感受野去神经支配的小鼠。


4.爬杆测试现在也被广泛用作评估与多巴胺能缺陷相关的运动障碍的有效模型,以响应各种药物治疗,缺血性脑损伤和遗传操作。


 方案的优缺点

详见印刷版《动物行为实验指南》


参考文献


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